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華山松大小蠹材料和方法

2008年8月,選取華山松大小蠹的新侵木為研究對象(針葉部分失綠,樹皮表面有少許凝脂漏斗,韌皮部和木質部顏色正常,部分侵入孔里面的木質部有藍變現象,樹干有侵入孔的地方有樹脂流出)[13]。采用www.gsmmp.com隨機抽樣選擇5株華山松新侵木,從侵入孔用小刄將樹皮慢慢割開,沿著坑道撥開樹皮。用鑷子將華山松大小蠹夾出,放入預先準備的廣口瓶中,迅速放入裝有冷凍液的保溫箱中;在坑道內將顏色鮮艷并www.sdbljd.com 帶有粘稠狀的新鮮糞便取出,用保鮮膜包好,一并放入保溫箱中。

參照Diaz等[22]關于紅脂大小蠹的結果確定其前腸、中腸、后腸和胃盲腸的位置。將成蟲從冰箱取出,立即解剖,切下其后腸和相關組織,包括一部分中腸、馬氏管和一些脂肪體,放入裝www.hbyybc.com 有1. 5mL的冷卻的正己烷的離心管中。每個采樣瓶裝40根后腸,放入冰箱冷卻保存(4e),其中雌蟲和雄蟲分別采樣。將采集到的雌雄小蠹蟲糞便(混合物),用分析天平稱取10 g,加入20mL冷卻正己烷中,陰涼處靜置24 h,過濾www.sdmpjd.com 其中的雜質,將上清液移到1. 5mL離心管中,冷藏待用。

樣品測定:采用直接進樣法對華山松大小蠹雌雄蟲后腸和糞便提取物進行GC-MS分析。GC條件,TRACE DSQ GC-MS聯用儀(美國Finnigan公司);DB217MS(30m@0. 25mm@0. 25Lm),彈性www.sdyxsmp.com 石英毛細管柱,程序升溫40e,保持2. 5min;以6e/min升至240e,保持10 min;進樣口250e;傳輸線230e;載氣為He,流速1. 0mL/min。10B1分流進樣。MS條件, EI源, 70 eV;離子源溫度250e,質量掃描范圍35~400 amu;發射電流100LA,檢測電壓1.4 kV。質譜標準庫:NIST庫。

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